適用細(xì)胞系

      HEK293無(wú)血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基是普諾賽研發(fā)團(tuán)隊(duì)自主研發(fā)和生產(chǎn)的無(wú)動(dòng)物源成份(Animal Derived Component-Free，ADCF)的細(xì)胞培養(yǎng)基。在多種293細(xì)胞系(293、293T、293A等細(xì)胞)上都可以支持細(xì)胞快速適應(yīng)，具有細(xì)胞活率高、維持時(shí)間長(zhǎng)、轉(zhuǎn)染效率高和產(chǎn)物產(chǎn)率高的特點(diǎn)。 

HEK293無(wú)血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基特性

      1. 本品不含任何動(dòng)物源性成分(Animal-Derived Component-Free，ADCF)。

      2. 本品含有氨基酸、維生素、葡萄糖、脂類、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子、水解物和微量元素，不含多肽。 

培養(yǎng)條件

     1. 培養(yǎng)溫度為37℃，在批次及批次流加培養(yǎng)工藝中，推薦初始細(xì)胞接種密度為0.5-1×106cells/mL。

     2. 在非自動(dòng)控制pH值條件下，建議CO2濃度控制在5%。

     3. pH、DO及溫度等工藝條件可根據(jù)工藝開發(fā)結(jié)果或平臺(tái)工藝參數(shù)設(shè)定。

培養(yǎng)基適應(yīng)（推薦）

    1. 直接適應(yīng)：最初培養(yǎng)階段，細(xì)胞按初始密度0.5-1×106cells/mL接種，直接將培養(yǎng)基更換為HEK 293無(wú)血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基，進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。待細(xì)胞培養(yǎng)2-3代，且細(xì)胞生長(zhǎng)穩(wěn)定后進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

    2. 間接適應(yīng)：HEK293無(wú)血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基與細(xì)胞原培養(yǎng)基依次按照(75:25, 50:50, 25:75, 0:100)比例混合進(jìn)行逐步傳代，建議每種混合傳代2-3代，可根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀況進(jìn)行調(diào)整；當(dāng)培養(yǎng)基完-全更 換為HEK293無(wú)血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基后，繼續(xù)傳代3-5次，至細(xì)胞生長(zhǎng)穩(wěn)定后進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

（注：具體培養(yǎng)工藝可根據(jù)實(shí)際項(xiàng)目需求自行調(diào)整）

數(shù)據(jù)支撐

細(xì)胞凍存

       使用本品制成的凍存培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞凍存，建議添加10% DMSO，細(xì)胞凍存密度1.0-2.0×107cells/mL。 

保存條件

  2-8℃，避光保存，有效期12個(gè)月。