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“膜” 法學(xué)院之常見(jiàn)問(wèn)題解決篇—困擾多時(shí)的問(wèn)題都有解答了！

閱讀：2243 發(fā)布時(shí)間：2018-7-16

上期我們?yōu)槟榻B了如何根據(jù)您的實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的超濾管，本期我們總結(jié)了超濾管使用過(guò)程中經(jīng)常遇到的問(wèn)題，分析問(wèn)題產(chǎn)生的原因并給您一個(gè)的解決方案。

超濾膜一次使用就碎了？可能和我們的離心機(jī)有關(guān)系

超濾管如果離心轉(zhuǎn)速過(guò)高，可能會(huì)導(dǎo)致膜甚至管子的破裂。離心機(jī)的轉(zhuǎn)速與離心機(jī)的半徑以及離心力都有關(guān)系，不同半徑的離心機(jī)，相同轉(zhuǎn)速出來(lái)的離心力也不一樣，可以公式換算！說(shuō)明書中明確指出使用超濾管的大轉(zhuǎn)速和離心力，做實(shí)驗(yàn)時(shí)要根據(jù)不同品牌的超濾管調(diào)整到離心力的承受范圍內(nèi)。另外，超濾管在離心機(jī)中的擺放也是有講究的，使用角轉(zhuǎn)子時(shí)，超濾管放置方式要求印有刻度一側(cè)朝上|朝外(這樣雙面膜才能發(fā)揮切向流的作用)，使用水平轉(zhuǎn)子沒(méi)有特殊要求；要不也會(huì)發(fā)生破裂哦～在濃縮管中加入樣品，不得超過(guò)大體積。（以Turbo15 為例，若使用水平轉(zhuǎn)子不得超過(guò)15ml 樣品，若角轉(zhuǎn)子則9ml）

雙面垂直膜--窗口朝上

單面垂直膜--刻度面朝上

另外，還要注意的是，離心15ml或是50ml外管的超濾管使用尖底的轉(zhuǎn)子，因?yàn)槌瑸V管的底部是尖底的。如果使用圓底的轉(zhuǎn)子，有可能無(wú)法把樣品管放滿，或是會(huì)增加外管底部磨損破損的幾率。

脫鹽濃縮，一個(gè)超濾管就可以搞定

濃縮用超濾管，脫鹽用透析袋或脫鹽柱，這是很多實(shí)驗(yàn)室一直沿用的實(shí)驗(yàn)操作。其實(shí)呢，超濾管做“脫鹽+濃縮”，也是很多蛋白操作高手的小訣竅。而如果你的樣品量有幾十毫升甚至幾升，選擇賽多利斯的超濾膜包會(huì)在一小時(shí)之內(nèi)完成自動(dòng)換液，非常的方便哦！

另外，賽多利斯的超濾管也有針對(duì)于換液的特殊設(shè)計(jì)：

a.加2ml樣品到濃縮管

b.清空濾過(guò)管

c.插入滲濾小管到濃縮管，加入10ml去離子水或是緩沖液。旋上蓋子

d.重復(fù)濃縮步驟，會(huì)有98%的無(wú)機(jī)鹽濾過(guò)

e.去除滲濾小管，回收濃縮后的樣品

我用濃縮后的蛋白做下游分析時(shí)發(fā)現(xiàn)有干擾，可能原因

超過(guò)濾薄膜含有微量甘油和NaN₃。如果此材料干擾分析，可用緩沖液或去離子水預(yù)清洗。如果干擾仍然存在，用0.1 N NaOH清洗，然后用緩沖液或去離子水再次清洗后甩干。同樣需要強(qiáng)調(diào)的是，如果用NaOH處理，可能會(huì)對(duì)RC膜有一定影響，所以，盡量選擇PES膜并且避免過(guò)夜浸泡。