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流式細胞儀是一種用于執(zhí)行流式細胞術測量方法的儀器。
該方法包括將激光束照射在流動液體樣本中的細胞上,檢測細胞發(fā)出的散射光和熒光,并測量細胞大小、數(shù)量以及細胞內和表面抗原等特征。
與熒光顯微鏡相比,流式細胞儀具有可同時定量多個測定項目、分析速度快等優(yōu)勢。另一方面,流式細胞儀不適合觀察細胞的形態(tài)特征。
流式細胞儀應用
流式細胞儀廣泛應用于細胞相關的生物和醫(yī)學研究以及臨床檢測和治療??梢詼y量多種細胞類型。我們分析外周血白細胞以進行疾病診斷,分析培養(yǎng)的動植物細胞以及成體干細胞和腫瘤起始細胞等稀有細胞以進行表征。
其他可測量的物體包括微生物、浮游生物、精子、酵母和乳膠珠等海洋生物。
流式細胞儀原理
流式細胞儀由三個主要元素組成:流體系統(tǒng)、光學系統(tǒng)和電氣系統(tǒng)。流體系統(tǒng)具有接收樣品并將其流入流動池的功能,激光通過由光源、透鏡、濾光片和檢測器組成的光學系統(tǒng)照射到流動池上,產生光電流。
然后通過電氣系統(tǒng)檢測和分析細胞發(fā)出的熒光。流體系統(tǒng)由管道、閥門和泵組成,用于將懸浮在樣品中的熒光標記細胞排列成一條線以供分析。
當激光束穿過細胞中稱為檢測點的部分時,光會發(fā)生散射,同時與細胞結合的熒光染料會被激發(fā),從而發(fā)出熒光。然后,散射光和熒光被檢測器檢測為信號。散射光有兩種類型:前向散射信號(FS)和側向散射信號(SS)。
FS和SS采用不同的檢測器進行檢測,F(xiàn)S反映細胞的大小,SS反映細胞內部的結構。檢測到的信號由電子系統(tǒng)轉換成數(shù)據,最終可以通過軟件進行解釋。