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天津市蘭博實驗儀器設備有限公司

會導致C18液相色譜柱堵塞的原因及預防方法分享

時間:2022-12-2 閱讀:534
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   C18液相色譜柱在吸附樣品時,樣品中所含有的鹽、脂質(zhì)、疏水蛋白質(zhì)和其它一些生物物質(zhì)都有可能與其發(fā)生相互作用,一些保留值較小的物質(zhì)如鹽類比較容易被沖出,而一些保留性較強的組分,流動相溶液不足以把這些物質(zhì)洗脫下來,多次上樣后,這些吸附在柱子表面的物質(zhì)通常就會積累在柱頭。
 
  其柱粒徑為2.7μm,由1.7μm直徑的實心核和0.5μm厚的多孔外層構(gòu)成。這種小粒徑填料具有與亞2微米柱類似的高柱效,但柱反壓低40-50%。這種高柱效、高分離度色譜柱可以用于任何類型的液相色譜。多孔層和實心核限制了擴散距離,提高了分離速度,而窄粒徑分布提高了柱效和分離度。
 
  C18液相色譜柱出現(xiàn)顆粒物堵塞的原因:
 
  可能堵塞進口端篩板(前篩板)和柱頭填料間隙的顆粒物來源有:樣品(制樣時灰塵和濾紙等帶入)、進樣閥密封圈磨損、流動相(溶劑本身含有和配制過程進入)、液相儀器中泵閥密封圈的磨損、緩沖鹽析出(一般在梯度運行和進樣時鹽的溶劑環(huán)境改變導致)。水和緩沖鹽流動相內(nèi)生長的細菌,也是顆粒物來源的一種,可堵塞篩板和填料間隙。應避免將這類流動相在室溫下久放,可放入冰箱存放。
 
  那么如何進行預防呢?
 
  樣品(甚至標準品)和流動相過濾,既預防了篩板、柱頭和毛細管堵塞,又能減少進樣閥、活塞桿和截止閥等儀器關鍵部件的磨損。濾膜材質(zhì)有再生纖維素、聚四氟乙烯、尼龍、硝酸纖維和醋酸纖維等,須根據(jù)和樣品溶劑及分析物的適應性慎重選擇。在線過濾器內(nèi)裝有可更換的濾片,濾片孔徑一般有2um和0.5um兩種。安裝位置有兩個可選擇,在進樣器和色譜柱之間時,對樣品和流動相中的顆粒物都有效;在泵和進樣器之間,則只對流動相有過濾作用。

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