一、免疫細(xì)胞無血清培養(yǎng)基概述

免疫細(xì)胞無血清培養(yǎng)基可用于臍帶血或外周血中分離到的單核細(xì)胞向CIK細(xì)胞（細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞）的體外誘導(dǎo)及體外大規(guī)模擴(kuò)增培養(yǎng)。

二、免疫細(xì)胞無血清培養(yǎng)基特點(diǎn)

1、無血清培養(yǎng)基，無添加細(xì)胞因子

2、無異源動(dòng)物成分，化學(xué)成分限定培養(yǎng)基

3、培養(yǎng)性能，支持高密度單核細(xì)胞培養(yǎng)

三、免疫細(xì)胞無血清培養(yǎng)基應(yīng)用

1、DC細(xì)胞、CIK細(xì)胞和NK細(xì)胞的長(zhǎng)期增殖培養(yǎng)

2、PBL細(xì)胞和TIL細(xì)胞的長(zhǎng)期增殖培養(yǎng)

3、單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的長(zhǎng)期增殖培養(yǎng)

4、T淋巴細(xì)胞的長(zhǎng)期增殖培養(yǎng)

四、免疫細(xì)胞無血清培養(yǎng)基使用方法

1、采集與分離外周血采集外周血，F(xiàn)icoll密度梯度離心分離收集單個(gè)核細(xì)胞。

2、單個(gè)核細(xì)胞的接種與誘導(dǎo)活化

1)0d時(shí)，繃胞計(jì)數(shù)。按細(xì)胞密度2x106cell/mL接種至對(duì)應(yīng)體積的培養(yǎng)液中。添加誘導(dǎo)因子YC001一支。添加10%比例的自體血漿。

2)1d時(shí)(24小時(shí))，添加誘導(dǎo)因子YC002、YC003、YC004至已經(jīng)接種細(xì)胞的培養(yǎng)液中。將YC005添加至未經(jīng)使用的培養(yǎng)基中，待用。

3、細(xì)胞的連續(xù)培養(yǎng)與擴(kuò)增

1)3d時(shí)，補(bǔ)入新鮮培養(yǎng)液，調(diào)整細(xì)胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。同時(shí)添加新加入培養(yǎng)液體積l10%比例的自體血漿。補(bǔ)液比例大致在1：2左右（原有培養(yǎng)液體積：新加培養(yǎng)液體積）

2)5d時(shí)，補(bǔ)入新鮮培養(yǎng)液，調(diào)整細(xì)胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。補(bǔ)液比例大致在1：3左右。

3)7d時(shí)，補(bǔ)入新鮮培養(yǎng)液，調(diào)整細(xì)胞密度至(06-08）x106cell/mL。補(bǔ)液比例大致在1：2左右。

4)9d時(shí)，將剩余培養(yǎng)液全部加入。

4、收獲細(xì)胞

培養(yǎng)周期結(jié)束后，依據(jù)細(xì)胞量收獲細(xì)胞。

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