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巴氏桿菌的特點(diǎn)與分類及培養(yǎng)特性與流行病學(xué)!

來源:北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司   2025年06月04日 16:34  

一、菌種簡(jiǎn)介

 

巴氏桿菌為無芽孢,不運(yùn)動(dòng),兼性厭氧,菌體兩端常染色濃重的革蘭氏染色陰性小桿菌。因1880年巴斯德氏首先自病雞分離到本屬中的多殺巴氏桿菌而得名。鼠疫桿菌、假結(jié)核桿菌、腸道結(jié)腸炎桿菌和土拉桿菌原歸本屬,現(xiàn)前三者改歸耶爾森氏菌屬,種改歸弗朗西斯氏菌屬。本屬已確定的種有多殺巴氏桿菌嗜肺巴氏桿菌、溶血巴氏桿菌、尿巴氏桿菌鴨疫巴氏桿菌等。

 

二、知識(shí)介紹

 

巴氏桿菌( Pasteurellaceae)包括巴氏桿菌屬、曼氏桿菌屬、里氏桿菌屬、放線桿菌屬和嗜血桿菌屬等。其中常見的病原菌有多殺性巴氏桿菌、鴨疫里默氏桿菌、副豬嗜血桿菌以及豬傳染性膜肺炎放線桿菌等。

 

多殺性巴氏桿菌引起多種家畜和家食巴氏桿菌病,在臨床上表現(xiàn)為出血性敗血癥、傳染性肺炎或局部慢性感染等。該菌革蘭氏染色為陰性球杄菌,瑞氏染色常能見兩極濃染。在鮮血培養(yǎng)基和血清平板上生長(zhǎng)良好,多殺性巴氏桿菌無溶血活性,普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)不良對(duì)小鼠和家兔有高度致病性,禽源株對(duì)鴿有很強(qiáng)致病性。

 

鴨疫里默氏桿菌原名鴨疫巴氏桿菌,是錐鴨傳染性漿膜炎的病原菌??梢?/span>1~8周齡,尤其是2~3周齡維鴨大批發(fā)病、死亡。鴨疫里默氏桿菌呈桿狀或橢圓狀,偶見個(gè)別長(zhǎng)絲狀,可形成莢膜,無芽孢。瑞氏染色可見兩極著色,革蘭氏染色為陰性。初次分離培養(yǎng)給予5%~10%的CO2可促進(jìn)其生長(zhǎng)。在巧克力或胰蛋白胨大豆瓊脂(TSA)平板上生長(zhǎng)良好普通培養(yǎng)基不生長(zhǎng)。副豬嗜血桿菌和豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌都是系統(tǒng)不的革蘭氏陰性桿菌,對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求較高,生長(zhǎng)需要血液中的生長(zhǎng)因子。副豬嗜血桿菌生長(zhǎng)需要血液中的V因子,初次分離時(shí)給予5%~10%的CO2可促進(jìn)該菌生長(zhǎng)。巧克力和TSA平板上生長(zhǎng)良好,有報(bào)道該榮在巧克力平板傳代培養(yǎng)效果不佳,添加V因子的TSA平板適合用于副豬嗜血桿菌的傳代培養(yǎng)。該菌形態(tài)多樣,不同地區(qū)分離該菌可見球桿菌、桿菌、長(zhǎng)絲狀等不同形態(tài)。該菌分離培養(yǎng)與保存難度較大,甘油保種存活率極低,常用冷凍真空干燥保存。豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌兼性厭氧,革蘭氏染色呈兩極染色的球桿菌,生長(zhǎng)溫度37℃,培養(yǎng)需添加V因子才能生長(zhǎng),常用巧克力培養(yǎng)基培養(yǎng)。在綿羊血平板上可產(chǎn)生穩(wěn)定的β溶血,CAMP試驗(yàn)陽(yáng)性。豬是豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌高度專一的宿主,寄生在豬肺壞死灶內(nèi)或扁桃體。

 

三、多殺性

 

多殺巴氏桿菌是一種兩端鈍圓,微突的短桿菌或球桿菌,長(zhǎng)0.6-2.5微米,寬0.25-0.6微米,不形成芽胞,不運(yùn)動(dòng),無鞭毛,革蘭氏染色陰性的需氧兼性厭氧菌。本菌在添加血清或血液的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好。在血瓊脂上生成灰白色,濕潤(rùn)而粘稠的菌落,不溶血;在普通瓊脂上形成細(xì)小透明的露珠狀菌落;在普通肉湯中,初均勻混濁,以后形成黏性沉淀和菲薄的附壁菌膜;明膠穿刺培養(yǎng),沿穿刺孔呈線裝生長(zhǎng),上粗下細(xì)。本菌的抵抗力不強(qiáng),在直射陽(yáng)光和干燥的情況下迅速死亡;60℃10min可殺死;一般消在幾分鐘或十幾分鐘內(nèi)可殺死。3%石炭酸和0.1%水在1min內(nèi)可殺菌,10%石灰乳及常用的甲醛溶液3-4min內(nèi)可使之死亡。在無菌蒸餾水和生理鹽水中迅速死亡,但在尸體內(nèi)可存活1-3個(gè)月,在廄肥中亦可存活一個(gè)月。

 

用特異性莢膜抗原(K抗原)吸附于紅細(xì)胞上作被動(dòng)血凝試驗(yàn),分為A、B、D、E四型血清群;利用菌體抗原(O抗原)作凝集試驗(yàn),將本菌分為12個(gè)血清型。若將K、O兩種抗原組合在一起,迄今已有16個(gè)血清型。該病的病型,宿主特異性,致病性,免疫性等,都與血清型有關(guān)。

 

本菌可使雞、鴨等發(fā)生禽霍亂,使豬發(fā)生豬肺疫,使各種牛、羊、兔、馬以及許多野生動(dòng)物發(fā)生敗血癥。

 

四、溶血性

 

形態(tài)、培養(yǎng)和抵抗力與多殺性巴氏桿菌基本相似,但在血瓊脂上新分離菌菌落產(chǎn)生β溶血,連續(xù)繼代培養(yǎng)后,溶血性減弱或消失,在羔羊血瓊脂上可生成雙溶血環(huán)。在麥康凱瓊脂上能緩慢生長(zhǎng),菌落為紅色,不產(chǎn)生靛基質(zhì),一般能發(fā)酵乳糖,產(chǎn)酸,對(duì)家兔無致病力。根據(jù)生化反應(yīng)和致病性的不同,可分為A和T兩個(gè)生物型;A型引起牛、綿羊肺炎和新生羔羊敗血癥;T型引起3月齡以上的羔羊敗血癥。另外還可按其可溶性莢膜抗原(K抗原)用間接紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)分為12個(gè)血清型,其中3、4、10屬于T生物型,其余各型均屬于A生物型,所有血清型都可見于綿羊、山羊,牛僅見1型。

 

五、菌株特點(diǎn)

 

本屬菌體大?。?/span>0.3~0.5)×(1.0~1.8)微米。卵圓形或桿狀,單個(gè)、成對(duì)或少數(shù)成短鏈。感染動(dòng)物體液或組織制片中的菌體兩極濃染更為明顯。用姬姆薩氏染色液或美蘭染色,可見到薄莢膜。普通肉湯即可生長(zhǎng)。除產(chǎn)氣巴氏桿菌能產(chǎn)生微量氣體外,本屬各成員均能利用葡萄糖等碳水化合物,產(chǎn)生少量酸而不產(chǎn)氣,有過氧化氫酶,常有氧化酶、還原硝酸鹽、不液化明膠。甲基紅(MR)反應(yīng)陰性,VP反應(yīng)陰性,適溫為37℃。DNA中的G+C克分子含量為36.5~40.05%。

 

本屬菌寄生于哺乳動(dòng)物和禽類,當(dāng)外界劇變或機(jī)體抵抗力降低時(shí),可成為急、慢性病或流行性疾病的病原。人偶有感染成為慢性疾患,如心包炎和被犬、貓咬傷發(fā)生膿灶等。

 

本屬中的多殺巴氏桿菌為害畜、禽最嚴(yán)重,從發(fā)病動(dòng)物體液或組織中培養(yǎng)分離到的菌落基本有兩型:一為過45°折光,在低倍顯微鏡下,呈現(xiàn)鮮明的藍(lán)綠色而帶金光,邊緣有狹窄的紅黃色帶的Fg菌落型。相當(dāng)于血清型乙型。對(duì)小白鼠、家兔和豬毒力強(qiáng)大,每只注射活菌10~200個(gè)即可致死,而對(duì)家禽每只必須注射10個(gè)以上才可致死。

 

另一為在45°折光下,菌落呈現(xiàn)橘紅色,邊緣稍帶狹窄的黃綠光的FO菌落型,相當(dāng)于血清型甲型。對(duì)雞、鴿毒力強(qiáng)大,對(duì)豬的毒力較次,家兔對(duì)兩型的致死量無甚差異。

 

在中國(guó),牛、豬、驢和馬的多殺巴氏桿菌病絕大多數(shù)為Fg型菌所致,家禽流行性巴氏桿菌病都是FO型菌所致。慢性病例中偶爾發(fā)現(xiàn)菌落較小、折光下呈現(xiàn)淡藍(lán)色的菌落。自病兔分離的菌落也都是FO型。

 

多殺巴氏桿菌菌體抗原有12個(gè)型,莢膜抗原有5個(gè)型,前者以阿拉伯?dāng)?shù)字表示,后者以英文大寫字母表示,如1:A,2:A,1:B等。已知組成的菌型有16個(gè)。血清型與宿主的分布有一定關(guān)系。細(xì)胞壁含有明顯的內(nèi)毒素活性,但未發(fā)現(xiàn)外毒素。本菌可引起家禽霍亂的暴發(fā)性流行,牛的出血性敗血病、原發(fā)性或繼發(fā)性肺炎等。國(guó)外免疫用的菌苗以加不同佐劑的滅活菌為主,也使用禽霍亂弱毒活菌。中國(guó)已于1959年使用弱毒活苗。

 

其他幾個(gè)如嗜肺巴氏桿菌可感染牛、小鼠、兔或人,引起胸膜肺炎;溶血巴氏桿菌可感染牛、羊,引起牛、羊肺炎或敗血癥;巴氏桿菌可在健康人鼻中發(fā)現(xiàn),偶致臭鼻病??捎没前匪幹委?,抗生素與高度免疫血清合用效果更好。

 

六、菌株分類

 

要是按照類型劃分的話,巴氏桿菌可以分成多殺巴氏桿菌、溶血性巴氏桿菌。這兩種桿菌都很壞,多殺巴氏桿菌會(huì)使雞和鴨等動(dòng)物發(fā)生禽霍亂,會(huì)使豬患上肺疫,還會(huì)使其他動(dòng)物發(fā)生敗血癥,這些動(dòng)物中包括牛,羊,兔子以及其他很多野生動(dòng)物。溶血性巴氏桿菌會(huì)感染牛和羊等,讓它們感染上敗血癥和肺炎。還能讓這些動(dòng)物們感染上胸膜肺炎。

 

七、培養(yǎng)特性

 

急性死亡動(dòng)物,菌落光滑、圓整,半透明的中等大小菌落,折射光線下觀察,菌落顯示熒光。肉湯培養(yǎng)均勻一致渾濁,對(duì)小白鼠有一定致病力,稱這種菌型為光滑型。帶菌者或慢性患病動(dòng)物粗糙、不透明大菌落,肉湯培養(yǎng)一致渾濁,對(duì)小白鼠致病力不強(qiáng),稱中間型。帶菌動(dòng)物,菌落干燥、粗糙,肉湯培養(yǎng)有顆粒狀沉淀物,對(duì)小白鼠致病力弱,稱粗糙型。

 

八、抵抗力

 

這種菌不產(chǎn)生芽胞的小桿菌中,是對(duì)物理和化學(xué)作用抵抗力很低的一種。陽(yáng)光下10分鐘,水、土壤中不超過2周,室溫或4-8℃ 冰箱保存2-3周,真空存在5年。

 

九、流行病學(xué)

 

世界范圍,熱帶地區(qū)嚴(yán)重。易感動(dòng)物:豬、兔、黃牛、水牛、牦牛均易感。家禽雞、鴨、鵝均易感。發(fā)病無明顯季節(jié)性,但多發(fā)于冷熱交替期,故9、10、11月份常見。散發(fā)性或地方流行性,豬肺疫、鴨巴氏桿菌?。〒u頭瘟)可呈流行性。禽的強(qiáng)毒Fo型也可感染豬、牛等家畜,不過這樣引起的巴氏桿菌病多是散發(fā)性的。

 

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