氨基酸序列分析：技術(shù)與挑戰(zhàn)檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

氨基酸序列是dànbáizhì功能的基石，亦是理解生物體調(diào)控機(jī)制、疾病發(fā)展與分子藥物作用的關(guān)鍵入口。隨著蛋白組學(xué)的迅速發(fā)展，氨基酸序列分析已經(jīng)從傳統(tǒng)化學(xué)測(cè)定拓展至高通量、可修飾、多維度的數(shù)據(jù)整合階段，成為連接基因組與表型功能的重要橋梁。本文將探討當(dāng)前主流的氨基酸序列分析技術(shù)路徑、常見(jiàn)挑戰(zhàn)。

一、氨基酸序列分析的核心技術(shù)

1、串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）

當(dāng)前zuì常用的氨基酸序列分析方法是基于LC-MS/MS的質(zhì)譜測(cè)序技術(shù)。該方法以以下幾個(gè)步驟為核心：

（1）酶解處理：將目標(biāo)蛋白用yídànbáiméi等特異性酶切為多肽段。

（2）液相色譜分離：對(duì)復(fù)雜肽段進(jìn)行高效液相色譜分離，提升分辨率。

（3）一級(jí)質(zhì)譜（MS1）：檢測(cè)母離子的m/z，初步篩選多肽段。

（4）二級(jí)質(zhì)譜（MS2）：通過(guò)碰撞誘導(dǎo)解離形成b、y離子系列，根據(jù)碎片差值推斷氨基酸序列。

（5）數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)與序列識(shí)別：借助MaxQuant、PEAKS、Byonic等平臺(tái)還原肽段序列并映射到蛋白數(shù)據(jù)庫(kù)。

2、De novo測(cè)序

在無(wú)數(shù)據(jù)庫(kù)參考或未知蛋白研究中，使用de novo算法可根據(jù)碎裂譜圖直接重建氨基酸順序，適用于新物種研究或抗體可變區(qū)解析。

3、Edman降解

通過(guò)逐步化學(xué)切除N端氨基酸并進(jìn)行鑒定，可獲得短肽的序列信息。盡管該方法準(zhǔn)確性高，但已因通量與適應(yīng)性限制逐漸被質(zhì)譜法取代。

二、氨基酸序列分析中面臨的挑戰(zhàn)

1、蛋白復(fù)雜性

dànbáizhì經(jīng)過(guò)剪接變異、翻譯后修飾（PTMs）后，形成多種異構(gòu)體，顯著增加序列解析的復(fù)雜性。

2、修飾位點(diǎn)不確定性

如磷酸化、乙酰化、甲基化等PTMs常導(dǎo)致質(zhì)量偏移或碎裂路徑變化，對(duì)修飾定位精度提出挑戰(zhàn)。

3、樣本處理差異

蛋白的提取、酶解、純化等步驟若控制不當(dāng)，可能造成測(cè)序效率低、背景干擾高、序列中斷等問(wèn)題。

4、數(shù)據(jù)分析壓力

面對(duì)大量碎片譜圖，如何高效、準(zhǔn)確進(jìn)行數(shù)據(jù)庫(kù)匹配與人工干預(yù)驗(yàn)證，是影響序列還原質(zhì)量的關(guān)鍵因素。

三、百泰派克的氨基酸序列分析平臺(tái)

為應(yīng)對(duì)上述挑戰(zhàn)，百泰派克生物科技構(gòu)建了一體化蛋白序列解析平臺(tái)，具備以下特色能力：

• 高精度質(zhì)譜平臺(tái)（Orbitrap Exploris、Fusion Lumos）支持完整蛋白肽段的測(cè)序與修飾識(shí)別

• 標(biāo)準(zhǔn)化樣本預(yù)處理流程（還原、烷基化、自動(dòng)化酶解）保障樣本質(zhì)量

• 多策略數(shù)據(jù)分析管線（數(shù)據(jù)庫(kù)匹配 + de novo并行）提升序列還原率

• 支持序列比對(duì)、突變檢測(cè)、PTM標(biāo)注與可視化展示

• 跨平臺(tái)聯(lián)動(dòng)：支持蛋白測(cè)序、功能組學(xué)、抗體驗(yàn)證等多場(chǎng)景應(yīng)用

氨基酸序列分析不僅是對(duì)dànbáizhì本體的理解，更是揭示其功能狀態(tài)、疾病機(jī)制與藥物作用的核心前提。在質(zhì)譜平臺(tái)不斷升級(jí)與算法能力持續(xù)拓展的背景下，jīngzhǔn、高通量、可修飾識(shí)別的氨基酸序列解析將成為未來(lái)dànbáizhì研究的常規(guī)需求。百泰派克生物科技將持續(xù)提供前沿平臺(tái)與zhuānyè服務(wù)，賦能生命科學(xué)研究與生物技術(shù)創(chuàng)新。如您有蛋白測(cè)序、抗體驗(yàn)證、修飾分析等需求，歡迎聯(lián)系我們獲取定制方案。

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù)，包括對(duì)dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對(duì)于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測(cè)序法的dànbáizhì從頭測(cè)序服務(wù)，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問(wèn)題?？稍趩渭?xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過(guò)我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過(guò)CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù)；

2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái)，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

氨基酸序列分析：技術(shù)與挑戰(zhàn)檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹